内容摘要：

一、TLC的基本常识

二、展开剂必须先配现用

三、忘记给原料留样，怎么办？

四、DMSO或DMF的反应体系如何点板？

五、无水无氧体系怎么点板？

六、展开剂如何选择？

七、点板情况与预期不符，如何处置？

八、点板之后如何观察，如何显色？

九、点板可能出现哪些失误？

十、点板出现半月状或彗星状拖尾，可能是什么原因？

正文部分：

一、TLC的基本常识

TLC是薄层色谱法（Thin Layer Chromatography）的缩写，其目的是提供反应进程的准确信息，不是凑合了事、按部就班；不可以不点，也不可以点完都不看一眼。换言之，如果TLC不能提供明确信息，TLC就是失败的。

硅胶板一般是市售的，割好后按顺序紧密排号储存在干燥器里，随用随取。既不可随意堆放以免边角划破硅胶层导致整板报废，也不能放在空气中导致硅胶吸潮而报废。各组有各组的割板方法，这里不赘述。

TLC时硅胶板所处的玻仪叫展缸。展缸底放一张剪成圆形的滤纸，一来增加阻力避免板子滑倒，第二加速瓶内蒸气压饱和保证爬板速度和效果。爬板时必须把盖子盖上，否则蒸气压不饱和，爬板极慢且结果不准。点板用的毛细管，一般用直径0.5 mm的，普通长度100 mm；还有一种200 mm的，专门用来给无水无氧体系点板的。

点板时，先在板子的一端绘制一条基线，从左到右标明SMR三点，S表示原料（Substrate）M表示混合点（Mixture）R表示反应体系（Reaction）有时还可以点产物的标样P（Product）。M的目的是排除反应体系内大极性物质的干扰，同时使对比更直观。基线不可划得太高（浪费板子）也不可太低（被展开剂浸泡不仅爬板失败还污染展开剂）。点板后要吹一下（用嘴或洗耳球都可以，有必要可用热风枪）让极性溶剂挥发干净减少对点板结果的干扰。

无论哪个点都不能点得太浓，否则爬起来是一个长椭圆形完全无法判断，特别是产物和原料极性差别不大的反应。所以不可用太少的溶剂溶解样品，毛细管接触一下板子就迅速离开，多练习。

TLC用的溶剂叫展开剂，过柱子用的柱子叫淋洗剂，两者作用、原理均一样。爬板的点叫spot不叫dot。spot到基线的距离与溶剂前沿到基线的距离的比值称为比移值（Rf），有些课题组要求在SI中提供化合物在展开剂中的比移值，此时现配现用的原则（见第二条）更加重要，否则Rf就是错的。

二、展开剂必须先配现用

展开剂现配现用。例如用低沸点溶剂（乙醚、DCM等）配制的展开剂，夏天仅可爬2-3次，再多就会因溶剂挥发导致极性不准，爬板结果大为不同。因此建议用大口径的标本瓶作为展缸爬板，一次配10mL左右溶剂可以摊得很平，方便现配现用。不建议一次配几百毫升的展开剂随时倒着用，不仅危险（不得大量储存溶剂）而且不准（有机溶剂均易挥发）。

三、忘记给原料留样，怎么办？

最好不要忘记给原料留样。实在没留可以找相似结构的代替（比如对位溴的原料用间位溴或另一个苯环上的对位溴原料替代），但不一定能成，极性可能有细微差别导致判断错误。

四、DMSO或DMF的反应体系如何点板？

如果是DMSO或DMF做溶剂的反应，建议直接点板，热风枪高温吹干，冷却后再爬板；也可以取少量反应液在子弹头（离心管）里，加两滴EA和水，剧烈震荡后取上层清液点板。但这种方法既不能确保洗净所有DMF，也可能导致产物点太淡或反应体系损耗严重，故不建议。

五、无水无氧体系怎么点板？

无水无氧体系有两种，一种是只有单排管，胶塞插气球的，另一种是支口接双排管的。前者限于实验室条件，点板时只能用短管接氮气瓶，移除气球并扎在实心塞，调节阀门至小股气流，摘掉胶塞迅速点板；后者容易多了，先将三通调至U型鼓泡器，调节氩气流稳定，随后打开塞子直接点。还有另一种适用于两个体系的方法：在氩气下可以将10mL注射器针头插入，再将毛细管探入。但即使通过鼓泡器调匀气流，液体也易从毛细管中迅速涌起，慎用。上述操作都需要200 mm的毛细管。如果没有，只能用胶头滴管或长针头取样至子弹头再稀释，损失很大。

六、展开剂如何选择？

展开剂的选择也要结合实验事实，一般选择PE/EA体系，10/1的极性已经不小了。注意，原料和产物极性可能完全一致，所以点板看不出来不代表没反应，要结合粗核磁判断。如果一次爬板没分开，可以考虑同一极性或更小极性的展开剂多爬几次，或者换一种不同性质的极性溶剂，例如把EA换成DCM。

TLC时一般要让目标点爬到1/2到1/3高（Rf值），过低说明极性选小了或要多爬几次，过高则区分度差要换小极性展开剂。PE/乙醚体系的区分度可能比PE/EA更好，纯DCM的极性与PE/EA ＝ 10/1差不多。一些情况下可能需要三相体系，比如区分环丙烷的顺反构型，但往往需要课题组几代学生的反复尝试、积累经验。对于大极性物质比如醇或酸，点板选择PE/EA = 2/1乃至DCM/甲醇体系。

七、点板情况与预期不符，如何处置？

在点板前要对反应各点的极性情况有所预期，点板的实际目的是用来验证预期。预期应当基于化合物的结构。比如，产物中生成了原料中没有的酰基等大极性基团，那么产物的极性就应该比原料大；如果原料中的酰基捕获碳正离子生成环化产物，产物的极性就该比原料小。一些反应产物和原料极性几乎一致，比如TBAF脱硅基保护得到端炔的反应，或者端炔溴化生成炔基溴的反应，以及羟醛缩合制备查尔酮的反应。有些反应产物和原料差别很大，比如DMP氧化、LAH还原和酯的水解。

一旦出现异常，比如羟醛缩合所得大多为爬不起来的原点处spot，要考虑是不是没有脱水，要给反应升温以得到查尔酮；LAH还原得到小极性产物，可能是还原剂加多，过度还原得到亚甲基；酯的水解产物极性变小，有可能在高温下脱羧了；给氨基上甲基保护出现两个点，应该是上了一个甲基的产物和二甲氨基产物。

有些物质在硅胶中不稳定，比如亚胺在爬板时会水解变回羰基，所以反应结束与否，爬起来永远是两个spot。烯醇硅醚和酰基氯也是同理。有人建议亚胺爬板需要把展开剂碱化，但我做的亚胺在碱性条件下水解更严重。还有人建议合成酰氯时，先取样再加少许醇淬灭再点板。我的经验是，直接看大极性的羧酸点是否消失也能间接判断。硅胶的弱酸性还会使一些物质在爬板时发生重排/水解，爬的次数越多，产物点越小，杂点越大。值得注意的是，少数物质在硅胶上吸附能力差，吸一部分爬一部分，导致TLC是一条线。但这不影响它是纯的。我做过一个带三氟甲基的炔，就是上述情况。

八、点板之后如何观察，如何显色？

点板后一般要用紫外灯照射（254和365nm两种波长）观察，看起来白色的板子会变为绿色，可见光下看不到的spot会在254nm下变成紫色或紫红色，甚至变为蓝色和黄色。当原料和产物极性一致时，有时可以通过在不同紫外灯波长下的不同显色加以区分。

但是，有些化合物紫外线不显色或显色很弱（例如不含共轭结构的物质），这时需要显色剂。显色剂有很多种，配制方法自查，值得注意的是每一种显色剂都有寿命。

最常用的显色剂是高锰酸钾溶液，板子泡进去白色硅胶会变成鲜亮的紫色，spot会变为黄色乃至白色，共轭结构越大，显色越快，例如查尔酮不需要吹干当场显色。如果泡进去板子变成淡粉色，高锰酸钾溶液就坏了，重配。推荐配方：6 g 高锰酸钾+26.8 g 碳酸钾+3.3 mL 10% wt 的氢氧化钠溶液+400 mL 水。

碘缸也是一种常用的广谱显色剂，一些高锰酸钾都看不出来的，没有荧光的spot可以用它看出来。注意，碘缸显色是暂时的，随着碘的挥发板子会恢复原样。如果需要碘缸显色，须在浸泡高锰酸钾之前。

为了确保万无一失，每一个爬好的板子都要用254和365nm轮流照射，用铅笔圈出显色点，随后浸泡高锰酸钾并用热风枪吹干，观察哪些点让高锰酸钾褪色，以及褪色的先后顺序。这些都是指示反应结果的重要信息。

九、点板可能出现哪些失误？

其一，展开剂极性没选对，极性太大导致有杂点在溶剂前沿或与产物重叠，极性太小导致爬起来的是副产物而主产物在原点处；

其二，点样浓度没做好，太浓导致点太大无法判断，太稀导致杂点看不出来；

其三，有的物质本身没有荧光或荧光很弱，没有辅以显色剂观察；

其四，高沸点溶剂没吹干就爬板；

其五，误认为一个spot里一定只有一种东西，忽略了在当前展开剂中极性一致的副产物；

其六，对于陌生反应，淬灭-萃取后没有再点一次板以确认产物没坏；过柱-浓缩后没再点一次板以确认没有把淡杂点一起冲下来；

其七，展开剂用了太久，挥发严重导致极性不准；

其八，忽略产物在体系内是以盐的形式存在，爬板出现种种怪事，例如拖尾。

其九，展缸盖子没盖严或有裂缝。

十、点板出现半月状或彗星状拖尾，可能是什么原因？

其一，点得太浓或把固体点上了；

其二，点样点泡在展开剂里；

其三，硅胶板吸潮或质量差；

其四，化合物含有氨基、羧基、酰胺等大极性活泼氢基团；

其五，展开剂没选对，PE/EA不合适，换成DCM/MeOH试下；

其六，点样时（高沸点）极性溶剂没吹干；

其七，点样处太靠近板子边缘，中间爬得慢边上爬得快（边缘效应）。

其八，如果上述因素全部排除仍拖尾，考虑是否要把反应体系淬灭至中性再点板；产物是否可能在硅胶上分解；产物是否存在两个离得很近的异构体？